室温粉碎搅拌法从印楝种仁中萃取印楝素的研究

　　中国林副特产室温粉碎搅拌法从印楝种仁中萃取印楝素的研究P李晓升1，2，王有琼2，段琼芬2*，赵吉寿1（1.云南民族大学化学与生物技术学院，云南昆明650031；2.中国林业科学研究院资源昆虫研究所，云南昆明650224）印楝素萃取产率的影响。优化的工艺条件为：208g去油后的印楝种仁（相当于300g印楝种仁），以750ml醇做溶剂，在快速粉碎搅拌下萃取21min即可以达到高萃取产率，与微波辅助法、超声波法、浸提法相比，具有提取率高、设备和操作简单、节约溶剂、快速等特点。

　　物，含有300多种杀虫活性成分，其中杀虫活性强的是印楝素（Azadirachtin），整株印楝植物中均含有印楝素尤其种仁中含量丰富。印楝素自1968年被Bu-terworthJ.H和Morgan提取并鉴定以后」，得到了广泛的研究。印楝素对200多种昆虫（包括几乎所有重要的农林、仓储、卫生害虫）具有很强的生物活性，对这些昆虫具有很强的杀虫、拒食、抑制生长发育、胃毒、忌避、抑制呼吸抑制昆虫激素分泌和降低昆虫生育能力等作甩其中以杀虫、拒食、忌避和抑制生长发育作用尤为显著，同时对高等动物无害，对昆虫的天敌较安全，属于生物农药，不污染环境，有利于生态平衡及可持续绿色农业发展。此外，印楝素还有广泛的药用价值，如抗疟疾、退热、驱虫、抑制动物和人体内真菌生长、抗生育能力等17'8.我国自引种以来，在云南元江等地已培育印楝农药原料林十多万亩19，具有丰富的印楝原料资源。

　　印楝素的萃取工艺有溶剂萃取和超临界萃取两类'在溶剂萃取法中近年又引入超声波和微波辅助技术111，12，使溶剂萃取法的效率得到很大的提高。但以上各种方法也存在着各自的不足，如超临界法器设备要求条件高，微波法要求对提供微波辐射的设备进行改哜超声波法有噪音污染等。粉碎搅拌萃取印楝素的方法，是在用溶剂对印楝素萃取的过程中，对样品进行粉碎搅拌，可极大地加快印楝素的溶出速度，节约溶剂，印楝素的探测器产率高，无污染，设备和操作简单易行，生产成本低，适合工业化生产。其原理是：在粉碎机的作用下，样品与溶剂的相互作用剧烈，加快了印楝素的溶出速度，同时，样品颗粒被粉碎的愈来愈细小，萃取速度与萃取产率也随之提高。本文通过实验萃取时间、溶剂种类及用量，得出这种方法的佳操作条件，在此条件下，印楝素的萃取产率可达0.58，并且优于浸提法、微波法和超声波法。

　　1实验原料、设备、分析方法及实验方法1.1实验原料印楝种子（云南元江产）；印楝素A和印楝素B标准品（95.5，购于SigmaChemicalCo.）；石油酿（6090*C）；甲醇，二氯甲烷，乙醇，乙酸乙酯均为分析纯。

　　1.2实验设备搅拌机（欧科CD300C）；旋转蒸发（日本EYE-LA）；家用微波炉（松下家用型）；医用超声波清洗机1）基金项目：国家林业局*948*项目（200-58）1.3分析条件250mm）柱，流动相为甲醇和水的混合物（体积比为65：35），流速为1ml/min，检测波长为218nm. 4实验方法去油后的印楝种仁与甲醇混合，置于搅拌机中粉碎搅拌萃取（转速11000r/min），搅拌一段时间后减压过共萃取3次，合并3次的滤液，置于旋转蒸发中减压蒸馏（28*C，110hp），待甲醇蒸出后，取出浓缩物，加入同等体积的蒸馏水混合，再加入与混合物同等体积的二氯甲烷，然后置于分液漏斗中分液，二氯甲烷部分减压浓缩（15*C，110hp），即得到本实验的萃取物。

　　2结果与讨论本实验的条件选择包括溶剂的种类和用量、萃取时间。每次实验的样品为去油后的印楝种仁208g（相当于300g印楝种仁）。

　　1溶剂的选择不同的溶剂由于其极性的差异，对印楝素的溶解能力不同。以甲醇为溶剂时，液料比为3，萃取时间为3x7min.以其它溶剂做萃取剂时，液料比均为1*萃取时表1不同的溶剂对印楝素提取率的影响溶剂液料比萃取时间印楝素A的萃取产率（％）印楝素B的萃取产率（％）甲醇乙醇乙酸乙酯二氯甲烷印楝素的萃取产率=（印楝素质量/种仁质量）x100从表1可以看出，随着溶剂极性的减弱，印楝素A和印楝素B的提取率都降低，因此在以上几种萃取溶剂中甲醇为合适。

　　22甲醇的用量对印楝素萃取产率的影响以甲醇为溶剂，萃取时间为3x7min.甲醇用量与印楝素的萃取产率见表2.表2甲醇用量对印楝素萃取产率的影响甲醇的用量（ml）印楝素A的萃取产率（％）印楝素B的萃取产率（％）从上表中可以看出，甲醇的用量为750ml即可。

　　23萃取时间对印楝素萃取产率的影响以3x250ml甲醇为溶剂，萃取时间与印楝素萃取产率的关系见表3.表3萃取时间对印楝素萃取产率的影响萃取时间（min）萃取次数印楝素A的萃取产率（％）印楝素B的萃取产率（％）从上表中可以看出，每次萃取7m共萃取3次即可。

　　2.4与微波法，超声波法，浸提法相比较表4不同萃取方法相比较萃取方法萃取时间萃取次数液料比印楝素A的萃取产率（％）印楝素B的萃取产率（％）粉碎搅拌法微波辅助法超声波法浸提法从上表可以看出，粉碎搅拌萃取法对印楝素A和印楝素B的萃取产率高，较微波辅助法和超声波法节约溶剂，较超声波法和浸提法更为快速。

　　3结论粉碎搅拌法萃取印楝素的佳条件为：取208g去油后的印楝种仁（相当于300g印楝种仁），以750ml甲醇做萃取剂，粉碎萃取3x 7min，印楝素A的萃取产率为0.438，印楝素B的萃取产率为0.142.该萃取方法与微波辅助法、超声波强化法和浸提法相比较，印楝素的萃取产率高，节约溶剂，耗时短，无噪音污染（如超声波），设备和操作简单，一次可以处理更多的样品，更适合用于工业生产中，有广阔的应用前景。