超微粉碎对绿茶黄酮类物质提取率及风味物质含量的影响

　　黑龙江省教育厅科研项目（11511094）基金项目：江南大学博士后项目（006977）具有很强抗氧化能力的茶多酚是茶叶中对人体健康有益的物质，它能有效清除氧自由基和脂类自由基，预防脂质的过氧化，而且具有抑制肿瘤发生，延缓衰老和预防癌症等功能。茶多酚的主要组分是黄烷醇类、羟基-4-黄烷醇类、花色苷类和黄酮醇类等黄酮类物质。黄酮类物质占茶鲜叶干重15~ 28左右，是决定茶叶滋味，颜色的主体成分。

　　茶叶深加工通常以黄酮类物质、药用咖啡碱、茶多糖等功效成分为目的产物，经浸提或萃取后进一步纯化提高纯度，应用到食品和制药工业中。

　　影响茶叶中黄酮类物质提取率的因素主要有温度、萃取剂浓度、时间和固液比，此外茶叶粉碎程度也对提取率有影响。黄酮类物质检测通常以芦丁为标准品，在500nm波长下测定OD值计算含量或采用HPLC方法直接测定。

　　茶H+经过超微粉碎加工后，由于超微粉体比表面积和孔隙率的加，常具有的物理化学性能，例如良好的分散性、吸附性、溶解性、化学活性等，可以大大简化传统速溶茶生产方法中茶叶有效成分萃取出来后浓缩、干燥制成粉状速溶茶的工艺过程。

　　表2醇提法正交试验因素水平表水平因素A乙醇浓度（％）B是取时间（h）C是取温度（C）D固液比干法（球磨法）和湿法（胶体磨）超微粉碎效果比较以制冷粗粉碎法茶叶粉为对照，将干法（球磨法）和湿法（胶体磨）超微粉碎茶n十粉在正交试验中得出的佳条件（90乙醇，5h，55C，固液比为1：15）下按上述醇提的方法进行提取，测定三种绿茶粉的粗黄酮的含量。

　　粗黄酮的纯化纯化条件选用AB-8弱酸性阳离子交换树脂，1.5x子交换柱，称量15g树脂放入95的乙醇中浸泡8h，或回流溶胀2h，同时可排除气泡；用3~ 5的三倍体积盐酸浸泡2.5h，倾泻掉漂浮树脂，用蒸馏水反复清洗至pH为中性；再用3~ 5的三倍树脂体积的NaOH浸泡2.5h，洗至中性，放置在30的乙醇中。装柱后用30乙醇缓冲液，2n！/nin的流速平衡两倍体积以上，至流出液加水不呈白色浑浊为止。

　　分别将1n的醇提法得到的制冷粗粉和干、湿法超微粉的粗黄酮上柱，用30乙醇洗脱，流速为2n！/nin，每4min收集一管。用721E型可见分光光度计在500nm处测定吸光度。

　　黄酮含量的计算方法将收集的各管样品分别测得吸光值后绘制出黄酮含量的趋势圄，从出峰开始计算一直到出峰结束，根据标准曲线得到以上各管中黄酮的浓度，求出总和后乘以稀释的倍数。

　　茶叶粉中风味物质GC-MB检测样品处理将制冷、球磨和胶体磨处理后的茶叶粉采用醇浸提法优条件浸提，浓缩至膏状，将三种样品分别溶于95的乙醇，各取1ml进行气相色谙-质谙检测。

　　口样温度：250C；色谙柱温：120C，以8C/min进行升温，1min后升至240C；进样量：1ml；载气流速：1mi/min；载气：氦气；溶剂延迟：5min；质谙2结果与分析21黄酮含量测定标准曲线水浸提法提取粗黄酮的含量提取时间对粗黄酮提取率影响如圄2.随提取时间025提取次数对提取率的影响加，粗黄酮的含量也随之加，但当提取时间超过3h后，吸光度值反而下降。因此确定提取时间以3h为宜。经过两次提取后提取率明显加（如圄3），第三次提取后提取率基本持平，确定采用二次提取。

　　在时间相同，次数相同条件下水100C，醇60C条件下比较，结果发现醇提法显著高于水提的各结果，与中有机溶剂对黄酮的提取率高于水提法的提取率相符合。因此，本。

　　物质汽化后成分没有显著的变化，三种样品的主要成分是咖啡喊。

　　因此，干、湿法超微粉碎对黑木耳中主要挥发性风味物质的成分和含量没有影响，对于药用咖啡碱的开发也没有影响。

　　结论本实验采用水提和醇提两种方法tb较了绿茶中黄酮类物质的提取率，通过L9（34）正交试验摸索了效果较好的醇法提取粗黄酮的优条件：固液比为115，浓度为90的乙醇，提取温度45C，提取时间为5h.各因素对粗黄酮提取率影响的次序是：提取时间>乙醇浓度>提取温度>固液比。制冷粉碎、球磨法和胶体磨法三种样品在醇提佳条件下提取粗黄酮得率分别为452 52.4°39.8，其中球磨法的提取率高。三种样品的粗黄酮纯化后的得率分别为44.1848.78 65.19°，其中胶体磨的粗黄酮的纯化率高。并将三种样品的粗提取物进行气质色谱联用分析，发现茶叶经过超微粉碎其风味物质成分不会发生明显的变化。